北虫草菌种
如何获得北虫草菌种？
在具备食用菌生产设备的单位或个人，均可自行进行北虫草母种的分离培养。先配制最常用的综合马铃薯、葡萄糖、琼脂培养基。具体做法为：取去皮马铃薯200克，切成小块，加水1000毫升，煮沸20分钟，滤除渣取汁液于锅中。尔后加入20克琼脂溶化，再加入20克葡萄糖，磷酸二氢钾1克，硫酸镁0.5克。并搅拌均匀，并继续加热至琼脂完全熔化，最后补足水分至1000毫升。 培养基做好后，趁热分装试管。装量为试管长度的1/3～1/4。分装完后塞上棉塞，每7～10支捆成一捆，上包牛皮纸防潮并进行高压蒸气湿热灭菌（用1.05千克/厘米，121℃半小时），待压力降到0时，打开排气阀排出残留蒸气，取出试管及其他消毒物品，并趁热把试管摆成斜面，斜面长度为试管长度的1/3到1/2。 选择采集生长健壮，尚未散发孢子的北虫草，用清水轻轻冲洗外表至基本干净。用消毒刀片切取子实体上半部为2毫米左右见方小块，于75%酒精溶液中消毒2秒钟。再以0.1%升汞液消毒20～30秒，无菌水冲洗3次。置试管斜面培养基上20℃培养。也可取虫体，以0.1%升汞消毒1～3分钟，用无菌水冲洗虫体上残余升汞液后，用解剖刀在无菌条件下切去虫体外层。为防止虫体内细菌干扰，可用50微克/毫升的链霉素或青霉素浸沾虫体，然后切成绿豆大小组织放置斜面培养基上。在20℃温箱中培养。10天左右斜面上生成白色菌落，并有浅黄色色素产生则为北虫草菌丝体。但其性能是否可靠，还需将它们接种于米饭培养基上，在18～20℃进一步培养观察，纯化。选前期匍匐型菌丝量多，后期出草量多的菌种确定为母种。 如菌种生产经验不足或设备条件不具备，可向有关北虫草生产厂家或菌种生产、科研单位购买、引进。
北冬虫夏草液体菌种的制作配方
参考配方：北冬虫夏草液体菌种制备常用的培养液组成为：玉米粉 2%，葡萄糖 2%，蛋白胨 1%，酵母粉 0.5%，磷酸二氢钾 0.1%，硫酸镁 0.05%，pH 6.5～7.0。玉米粉加水煮沸10分钟，过滤取滤液，加入其它成分。
【一些配方中没有玉米粉，也没有酵母粉，但加了VB1，且量比各有不同。请参考分析！】
一是摇瓶培养：将培养液分装入500毫升锥形瓶内，每瓶100～150毫升，高压121℃保持30分钟灭菌，冷却后在无菌条件下接入斜面菌种一小块，安放在摇瓶机上，控温23±2℃，每分钟180转，振动培养；或往返式摇床，96～106次/分钟，振幅6～7厘米。一般培养96小时，菌液为棕色，有虫体浓郁味即可用于感染蚕蛹。
二是通气培养：即深层培养或液体发酵。但这需要发酵罐等设备。
北虫草母种菌种怎样制作液体菌种
2、配制方法：大米或小麦按每袋50克或100克分装入塑料袋。将1.5升50℃的热水倒入干净盆内，将虫草专用防污剂放入热水中，搅至完全溶解即成营养液。按料水比（即大米或小麦与营养液的用量比）1克：1.5毫升称取营养液倒入装好大米的塑料袋内。分装完后用塑料绳将每个塑料袋中部和口部各扎一道。
3、灭菌：灭菌锅内加适量水，把培养料袋放入灭菌锅，升温至100℃，保持1小时。取出，冷却后移入接种室。用优质气雾消毒剂或常规方法密闭消毒30分钟，即可穿戴消毒衣服进入接种室接种。
4、接种：进入接种室应迅速关好门（防止含有杂菌的空气进入）。接种工具、菌种外壁、操作人员双手等，用75%酒精擦拭或浸沾消毒。现介绍易推广的用固体大米菌种接种的方法：
①试管原种的转扩栽培：拔去试管塞后用消毒的接种钩挖取豆粒大小的菌种2-3块，接入培养基面上，稍扎紧袋口即可。
②用原种转扩栽培袋时，先将菌种捣成指头或豆粒大小块状，每袋接入5-10克菌种，均匀分布在料面上。如条件允许可适当增加接种量，以利菌丝较快生长。接种完后按原扎口方法稍扎紧袋口，即可移入经杀菌和防虫处理的培养室内培养。
③采用液体菌种接种方式的，在无菌条件下，打开封口材料，用接种枪将液体种喷匀即可。接种量视容器大小而定，也有在液体菌种中加入一定比例的无菌水再接种的。